
Expi293F和FreeStyle 293-F同屬HEK293家族的懸浮無(wú)血清衍生細(xì)胞系,核心區(qū)別集中在蛋白表達(dá)能力、配套體系和培養(yǎng)表現(xiàn)上,Expi293F是定位更高的高產(chǎn)升級(jí)版本,蛋白產(chǎn)量可達(dá)FreeStyle 293-F的2~10倍。
核心參數(shù)與性能差異
?細(xì)胞來(lái)源與定位?:FreeStyle 293-F是初代懸浮馴化的293F商業(yè)化版本;Expi293F是在293F基礎(chǔ)上二次亞克隆篩選的高產(chǎn)優(yōu)化株,屬于升級(jí)款。
?最高細(xì)胞密度?:FreeStyle 293-F上限為1~2×10? cells/mL,超過(guò)后蛋白產(chǎn)量會(huì)明顯下降;Expi293F可支持3~5×10? cells/mL的高密度培養(yǎng)。
?蛋白表達(dá)產(chǎn)量?:FreeStyle 293-F系統(tǒng)的典型IgG表達(dá)量在百毫克每升級(jí)別;Expi293F系統(tǒng)最高可達(dá)1~2g/L,比FreeStyle 293-F高出?6倍以上?。
?轉(zhuǎn)染效率?:FreeStyle 293-F常規(guī)轉(zhuǎn)染效率約70%~80%;Expi293F搭配專(zhuān)用ExpiFectamine 293試劑+轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑,轉(zhuǎn)染效率可達(dá)90%以上配套培養(yǎng)體系差異
?專(zhuān)用培養(yǎng)基?:FreeStyle 293-F適配FreeStyle™ 293 Expression Medium;Expi293F必須使用專(zhuān)屬的Expi293™ Expression Medium,該培養(yǎng)基專(zhuān)門(mén)針對(duì)高密度培養(yǎng)優(yōu)化,營(yíng)養(yǎng)支持能力更強(qiáng)。
?轉(zhuǎn)染配套試劑?:FreeStyle 293-F可兼容多種通用懸浮轉(zhuǎn)染試劑;Expi293F有g(shù)uan方配套的ExpiFectamine™ 293轉(zhuǎn)染試劑盒,搭配專(zhuān)屬轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑,是實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)量的核心配套條件。
?培養(yǎng)環(huán)境要求?:FreeStyle 293-F常規(guī)使用5% CO?培養(yǎng)即可;Expi293F更適配7%~8% CO?的培養(yǎng)環(huán)境,新手用常規(guī)5% CO?容易出現(xiàn)細(xì)胞狀態(tài)變差的問(wèn)題。
蛋白產(chǎn)物特性差異
?糖基化修飾?:兩個(gè)系統(tǒng)表達(dá)的IgG糖基化修飾模式整體高度相似,核心糖型分布沒(méi)有本質(zhì)差異,不會(huì)影響蛋白的基礎(chǔ)活性。
?表達(dá)周期?:FreeStyle 293-F完成一輪瞬時(shí)表達(dá)通常需要10~14天;Expi293F可將完整表達(dá)周期壓縮到5~7天,大幅縮短實(shí)驗(yàn)周期。
適用場(chǎng)景區(qū)分
?FreeStyle 293-F?:適合預(yù)算有限、對(duì)蛋白產(chǎn)量要求不高的小規(guī)模預(yù)實(shí)驗(yàn)、常規(guī)重組蛋白制備場(chǎng)景。
?Expi293F?:適合需要克級(jí)高產(chǎn)量蛋白、藥物候選分子快速制備、大規(guī)模瞬時(shí)表達(dá)的科研和工業(yè)生產(chǎn)場(chǎng)景。
Expi293F 與 HEK293(以及相關(guān) 293F)的主要區(qū)別集中在生長(zhǎng)方式和表達(dá)能力上:
1. 來(lái)源關(guān)系
Expi293F 是從經(jīng)典 HEK293 衍生出來(lái)的、專(zhuān)為高密度培養(yǎng)和高產(chǎn)蛋白優(yōu)化的懸浮培養(yǎng)細(xì)胞系,是 HEK-293 的一個(gè)亞克隆
2. 生長(zhǎng)方式(最核心區(qū)別)?
HEK293:貼壁生長(zhǎng),適合小規(guī)模蛋白表達(dá),但規(guī)?;芟蕖?/p>
Expi293F / 293F:可懸浮培養(yǎng),適合大規(guī)模生產(chǎn)和高密度培養(yǎng),可在無(wú)血清培養(yǎng)基條件下穩(wěn)定懸浮生長(zhǎng)。
3. 表達(dá)性能
Expi293F 相比標(biāo)準(zhǔn) 293 細(xì)胞高度可轉(zhuǎn)染,瞬時(shí)蛋白表達(dá)產(chǎn)量更高,生長(zhǎng)更快、存活率更高。
與 293F 相比,Expi293F 生長(zhǎng)更快、存活率更高,能高效轉(zhuǎn)染,可更高效獲得外源蛋白
從表達(dá)水平上看,293F/Expi293F 的表達(dá)水平一般高于貼壁的 HEK293。
4. HEK293 本身的特點(diǎn)
HEK293 為未轉(zhuǎn)染的原代細(xì)胞,多用于短期實(shí)驗(yàn)(如 RNA 干擾或瞬時(shí)轉(zhuǎn)染);轉(zhuǎn)染效率高,適用于小規(guī)模快速驗(yàn)證。
5. 應(yīng)用選擇
小規(guī)模、信號(hào)通路/膜蛋白/藥物篩選等研究多用貼壁的 HEK293;
大規(guī)模生產(chǎn)抗體、疫苗、復(fù)雜蛋白解析等用 Expi293F/293F。
簡(jiǎn)單說(shuō):同樣源自 HEK293,但 Expi293F 是為懸浮、高密度、高產(chǎn)瞬時(shí)表達(dá)而優(yōu)化的亞克隆,更適合大規(guī)模重組蛋白生產(chǎn)。如果你是在做哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)選型,通常小規(guī)模驗(yàn)證用 HEK293,大規(guī)模生產(chǎn)優(yōu)先選 Expi293F。
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