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當(dāng)前位置:首頁(yè)   >  產(chǎn)品中心  >  PCR試劑盒  >  普通PCR檢測(cè)試劑盒  >  1599236石斛探針?lè)≒CR鑒定試劑盒

石斛探針?lè)≒CR鑒定試劑盒

簡(jiǎn)要描述:石斛探針?lè)≒CR鑒定試劑盒,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營(yíng)ATCC細(xì)胞,細(xì)胞系,原代細(xì)胞,重組蛋白,ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、動(dòng)物血清和培養(yǎng)試劑等

  • 產(chǎn)品型號(hào):1599236
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2025-09-24
  • 訪  問(wèn)  量:332

詳細(xì)介紹

本產(chǎn)品僅供科研,不得做其它用途

更多產(chǎn)品詳細(xì)信息可向客服免費(fèi)索取訂購(gòu)。

本產(chǎn)品就是根據(jù)PCR原理專(zhuān)門(mén)開(kāi)發(fā)的試劑盒,它具有下列特點(diǎn):

1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品DNA模板。

2. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。

3. 產(chǎn)品精心優(yōu)化且特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟除此之外的其它微生物DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。

4. PCR mix中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。

5. 本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的PCR反應(yīng)。

6. 本產(chǎn)品只能用于定性實(shí)驗(yàn),不能用于定量。

7. 本產(chǎn)品只能用于科研

石斛探針?lè)≒CR鑒定試劑盒

石斛探針?lè)≒CR鑒定試劑盒樣品的制備 

試劑盒組成

序號(hào)

組成

50T/盒

1

RT-PCR反應(yīng)液

875 μL×1管

2

  混合酶液

125 μL×1管

3

  陽(yáng)性對(duì)照

40 μL×1管

4

  C 陰性對(duì)照

40 μL×1管

5

說(shuō)明書(shū)

1份








【儲(chǔ)存條件及有效期】避光-20℃以下保存,避免反復(fù)凍融,有效期12個(gè)月。

【適用儀器】 ABI7500、羅氏 96/480、安捷倫、伯樂(lè)、國(guó)產(chǎn)博日、宏石等各種熒光定量 PCR 儀。

定義和原理

PCR 探針?lè)ㄔ噭┖惺腔诰酆厦告準(zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù),結(jié)合探針來(lái)檢測(cè)特定核酸序列的工具包。其原理是在常規(guī) PCR 基礎(chǔ)上,加入了一段能與目標(biāo)核酸序列特異性結(jié)合的熒光標(biāo)記探針。在 PCR 擴(kuò)增過(guò)程中,當(dāng)探針與目標(biāo)序列結(jié)合后,通過(guò)熒光信號(hào)的變化來(lái)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè) PCR 產(chǎn)物的擴(kuò)增情況。

主要組成成分

引物:是一小段單鏈 DNA 或 RNA,與目標(biāo)核酸序列兩端互補(bǔ),引導(dǎo) DNA 聚合酶進(jìn)行 DNA 合成,決定了 PCR 擴(kuò)增的特異性和范圍。

探針:帶有熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán),在完整狀態(tài)下,淬滅基團(tuán)抑制熒光基團(tuán)的熒光信號(hào)。當(dāng)探針與目標(biāo)序列結(jié)合并被核酸酶切割后,熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)分離,從而產(chǎn)生熒光信號(hào)。

DNA 聚合酶:負(fù)責(zé)在引物的引導(dǎo)下,將脫氧核苷酸(dNTPs)逐個(gè)添加到引物的 3' 端,合成新的 DNA 鏈。

dNTPs:即脫氧核苷三磷酸,包括 dATP、dTTP、dCTP 和 dGTP,是合成 DNA 的原料。

反應(yīng)緩沖液:為 PCR 反應(yīng)提供適宜的 pH 值、離子強(qiáng)度等環(huán)境條件,保證 DNA 聚合酶的活性和反應(yīng)的順利進(jìn)行。

常見(jiàn)類(lèi)型

TaqMan 探針?lè)ㄔ噭┖校篢aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,其 5' 端標(biāo)記熒光報(bào)告基團(tuán),3' 端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。在 PCR 擴(kuò)增過(guò)程中,Taq DNA 聚合酶的 5'-3' 外切酶活性會(huì)將與目標(biāo)序列結(jié)合的探針切割,使熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)分離,熒光信號(hào)增強(qiáng)。通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào)的強(qiáng)度,可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè) PCR 產(chǎn)物的擴(kuò)增情況。

分子信標(biāo)探針?lè)ㄔ噭┖校悍肿有艠?biāo)是一種具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的寡核苷酸探針,其兩端分別標(biāo)記熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)。在沒(méi)有目標(biāo)序列存在時(shí),分子信標(biāo)呈發(fā)夾結(jié)構(gòu),熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)靠近,熒光信號(hào)被淬滅。當(dāng)存在目標(biāo)序列時(shí),分子信標(biāo)與目標(biāo)序列雜交,發(fā)夾結(jié)構(gòu)打開(kāi),熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)分離,產(chǎn)生熒光信號(hào)。

優(yōu)點(diǎn)

高特異性:探針與目標(biāo)序列的特異性結(jié)合,大大提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性,能夠有效區(qū)分相似的核酸序列。

高靈敏度:可以檢測(cè)到低拷貝數(shù)的目標(biāo)核酸,適合微量樣品的檢測(cè)。

實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè):能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè) PCR 擴(kuò)增過(guò)程,準(zhǔn)確地測(cè)定起始模板的拷貝數(shù)。

操作簡(jiǎn)便:試劑盒提供了預(yù)混好的反應(yīng)體系,減少了操作步驟和誤差。

【注意事項(xiàng)】

1.使用本試劑盒的實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)嚴(yán)格按照國(guó)家有關(guān)部分頒布的有關(guān)基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范進(jìn)行管理;

2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理;

3.各區(qū)域物品均為專(zhuān)用,不得交叉使用,以免污染;檢測(cè)結(jié)束后,應(yīng)立即對(duì)工作臺(tái)清潔;

4.吸取反應(yīng)液時(shí),應(yīng)盡量避免產(chǎn)生氣泡;上 PCR 儀前,應(yīng)注意檢查各反應(yīng)管是否蓋緊,以免液體蒸發(fā)造成結(jié)果不準(zhǔn)確;

5.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心;

6.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放;

7.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記;

8.檢測(cè)過(guò)程中使用過(guò)的吸頭,應(yīng)直接打到盛有 10%次氯酸的廢物缸內(nèi),檢測(cè)結(jié)束的PCR 反應(yīng)管,切忌開(kāi)蓋,并與其他廢棄物品一同滅菌后丟棄;工作臺(tái)及各種實(shí)驗(yàn)用品應(yīng)定期用 10%次氯酸、75%酒精或紫外燈進(jìn)行消毒;

9.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用;并在有效期內(nèi)使用。

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